基因編輯技術：進展與挑戰_08靠設計模型中國發展門戶網－國家發展門戶

requestId:68c454b85292c5.37857534.

CRI玖陽視覺SPR/Cas9 衍生模型技術

隨著人形立牌 CRISPR/Cas 系統的研究不斷深入，Ca模型s9 核酸酶的催化機制也被揭示，并且可以全息投影通過特定位點氨基酸的突變獲得單鏈靶向剪切功能的 Cas9 切刻酶（Cas9 nickase，Cas9n）或者全失活的 Cas9（dead Cas9，dC互動裝置as9），而這些不同活動佈置的 Cas9 核酸酶，衍生出了適用范圍更為廣泛的FRP基因展場設計編輯系統。

CRISPR/Cas9-nickase 基因活動佈置編輯技術。CRISPR記者會/Cas9 系統使用的 crRNA 能容受一定程大圖輸出度FRP的錯配導致脫靶效應的產生，限制了 CRISPR/Cas9 舞臺背板系統在高精度編輯中的應用。記者會為了提高 Cas9 編輯系統的精度，Ran 等巧妙利用 Cas9 D10A 突變體具備切刻酶活性的特性，設計了“一個位點，雙 sgRNA 靶向”的策略，即 CRISPR/Ca展覽策劃s9-nickase 基因編輯技術（圖 2a）。其原理與 ZF策展N 和 TALEN 類似，兩個 Cas9n/sgRNA 復合物同時靶向一個位點，分別切割其記者會中一條 DNA 鏈人形立牌，實現雙鏈斷裂啟動儀式，誘導 NHEJ 或者 HR 修復。使用這種策略，細大圖輸出胞系啟動儀式中基因編輯的脫靶效率最高可以降低參展近 4 個數量廣告設計級。

CRISPR/dCas9-FoKI基因編輯技術。同樣是為了解決 CRISPR/Cas9 技術的脫靶問題，Guilinger 等采用了基于大型公仔人形立牌 dCas9 的策略。理論上 dCas9/sgRNA 只能起到單純的靶向引導作用，無法誘導 DNA 的斷裂，類似于 ZFN 或者 TALE展覽策劃N 中的 DNA 結合結構域。為了實現 DNA 的切割，其引入的 FoKI 核酸內切酶的切割結構域（圖 2b），與 dCas9 連接包裝設計做成融合蛋白 fCas9，這與 ZFN 及 TALEN 的設計策略如出一轍。在模型人類細胞的基因編輯中，fCas9 的特異性比野生型 Cas9 要高出 140 倍以上。而在高度類似的脫靶位點上，fCas9 的特異性要比 Cas9n 至少高出 4 倍。fCas9 的應用將進一步豐富 Cas品牌活動9開幕活動 工具箱品牌活動，提供更完善的基因編輯工具。

TC:08designfollow